流式细胞仪荧光染色对照的设置-中国仪器网 - 澳门永利网上娱乐
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流式细胞仪通过检测器接收激光照射液流内的细胞或者颗粒产生光信号,经过光电转换和分析,从而反映细胞的物理化学特征和细胞的功能。下面就让小编给你介绍一下流式细胞仪中荧光染色对照的设置。

一、阴性对照

空白对照

自发荧光,就是经过光照而不是经过荧光染色体细胞内部的荧光分子发出的荧光。自发荧光信号是噪声信号。通常,细胞中能够产生自发荧光分子的含量越多,自发荧光越强,比如肿瘤细胞,粒细胞等。样本死细胞的比例越高,自发荧光越强。

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实验样本

特异荧光,就是抗体F(ab’)2段和细胞抗原特异结合的荧光染料经光照发出的荧光。

非特异荧光,就是抗体Fc段和细胞表面的Fc受体非特异结合的荧光染料经光照发出的荧光。

二、同型对照

和实验染色的单克隆抗体特异性没有关系的免疫球蛋白亚型(F(ab’)2段不一样,Fc段一样)。

和染色的单克隆抗体

1)一样的种类来源

2)一样的免疫球蛋白亚型

3)一样的荧光素标记

4)一样的浓度和量

5)是用未免疫的的动物的血得到的

用来清除因为抗体非特异结合到细胞表面的Fc受体所产生的背景染色。

三、补偿对照

荧光补偿指的是在流式细胞多色分析中,调整荧光素发射光谱重叠的问题,就是从一个被检测的荧光信号去除所有其他的干扰的荧光信号。

在双色或者多色分析中,当荧光素发射光谱重叠时,使用单种荧光素标记的单克隆抗体与其他荧光素对应的同型对照抗体分别进行染色。


2019-04-16 15:11:57 浏览次数:28次